ПРИГОТОВЛЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
DOI:
https://doi.org/10.52578/2305-9397-2024-3-1-114-124Ключевые слова:
сибирская язва, , антиген, штамм, инактивация, активностьАннотация
В данной работе был исследован вакцинный СТИ-1, сибиреязвенная культура (матрикс № 71 вторая вакцины Ценковского) и эпизоотический штамм 78/НИИПББ на определение наилучшего метода получение антигена с оптимально высокой концентрацией и активностью, для приготовления диагностического набора. Осуществлен сравнительные анализы влияние температурно-временного режима на объем и активность антигена. Возбудители сибирской язвы были культивированы в питательных средах Хоттингера ФБУН ГНЦ ПМБ Россия и в бульоне Хоттингера ФБУН ГНЦ ПМБ Россия. Активность полученных антигенов определяли постановкой РНГА используя диагностикум эритроцитарный сибиреязвенный иммуноглобулинный, сухой, постановку РДП проводили на Bacto agar с риванолом, также измеряли концентрацию белка на Genway, Genova plus методом Лоури. Далее используя выбранную методику культивирования штаммов СТИ-1, Ценковского и 78/1 нами были приготовлены антигены 7-и разными способами. Установлены, что оптимальными условиями культивирования штаммов СТИ-1 и Ценковского является 48-72 часа для эпизоотического штамма 78/НИИПББ оптимальным временем культивирования является 36 часов, при 37 °С. Далее используя данный температурно-временной режим были приготовлены антигены 7-и разными способами. В результате наиболее активные антигены получены №1 способом, у которых активность в РДП составила 1:32, в РНГА - 1:1024. Также для полноты исследования был подобран стабилизатор для лиофилизации и хранение антигенов. Исходный активность антигена в РДП 1:32, а со стабилизатором после сушки составило 1:16, в РНГА исходный активность 1:2048, после сушки 1:512-1:1024.
Библиографические ссылки
Michael, F. C. ELISA techniques [Text] / F. Michael, Clark, M. Richard. Lister, Bar-Joseph Moshe // Methods in Enzymology - 1986. - V. 118. – P. 742-766.
Кадастр почвенных очагов сибирской язвы на территории Республики Казахстан[Текст]. - Алматы, 2017 г. – С. 263.
Жакыпбек, А. Эпизоотическая ситуация сибирской язвы по республике Казахстан за период с 2014 по 2023 годы [Текст] / А. Жакыпбек, М. Сейсенбаева, Н. Оразымбетова, Ж. Кошеметов, Б. Умуралиев, И. Акежан // Вестник Ошского государственного университета. Сельское хозяйство: агрономия, ветеринария и зоотехния, (2(7), -С. 123–135. https://doi.org/10.52754/16948696_2024_2(7)_13
World Health Organization. Anthrax in humans and animals. 4th ed. Geneva, WHO Press [Text], 2008.
Лухнова, Л.Ю. Сибирская язва на территории республики Казахстан в 1999-2020 годах эпидемиологическая ситуация [Текст] / Л.Ю.Лухнова, У.А.Избанова, Т.В.Мека-Меченко. // Национальные приоритеты России. 2021. -№3. (42).
Romero-Alvarez, D. Potential distributions of Bacillus anthracis and Bacillus cereus biovar anthracis causing anthrax in Africa [Text] / D. Romero-Alvarez, A.T. Peterson, J.S. Salzer, C. Pittiglio, S. Shadomy. // PLOS Neglected Tropical Diseases (2020). - 14(3): e0008131. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0008131
Goel, A.K. Сибирская язва: болезнь биологической войны и значение общественного здравоохранения [Текст] / AK. Goel // World J Clin Cases, – 2015. – 3(1): P. 20-33.
Родионов, А. П. Особенности природной очаговости сибирской язвы и экологии Bacillus anthracis [Текст] / А.П. Родионов и др. // Ветеринария сегодня. – 2021. – №. 2. – С. 151-158.
Hugh, J.M. The ecology of Bacillus anthracis [Text] / M. Hugh Jones, J. Blackburn // Mol.Aspects Med. – 2009. - 30 (6). – Р. 356–367.
Kolonin, G. V. On the role of birds in epizootology of anthrax [Text] / G. V. Kolonin. // Тhe Russian Journal of Ornithology. 2017. – V. 26 (1397). -P. 327–329.
Finke, E. The risk of contracting anthrax from spore-contaminated soil [Text] / E. Finke, W. Beyer, U. Loderstädt, & H. Frickmann. // A military medical perspective. European Journal of Microbiology and Immunology. - 2020. – 10(2). -Р. 29-63.
Галиуллин, А. К. Субъединичный сибиреязвенный антиген и его диагностическое значение [Текст] / А. К. Галиуллин и др. // Ветеринария. – 1996. – №. 1. – С. 23-25.
Задорина, И.И. Получение и очистка противосибиреязвенных иммуноглобулинов [Текст] / И.И. Задорина // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. – 2019. – №4. – С. 142-148.
Абдрахманов, С.К. Эпизоотическая оценка и районирование территории Акмолинской области по степени биологической безопасности при сибирской язве [Текст] / С.К. Абдрахманов, Е.Е. Муханбеткалие, К.К. Бейсембаев, Т.Г Бакишев // ISBN 1607 ISBN 1607 – 2774. Семей қаласының Шəкəрім атындағы МУ Хабаршысы. – 2016. – №4. (76) - С.3‐7.
Избанова, У.А. Современная эпизоотолого-эпидемиологическая ситуация по особо опасным инфекциям (сибирская язва, туляремия, бруцеллез) [Текст] / У. А. Избанова, Л. Ю. Лухнова, Т. Н. Куница и др. // Журнал «Окружающая среда и здоровье человека». – Алматы. -2017. – № 1. – С. 23-37.
Лухнова, Л. Ю. Профилактика сибирской язвы в Казахстане [Текст] / Л.Ю. Лухнова – Алматы.- 2001. - С. 146.
Лухнова, Л. Ю. Сибирская язва в 2016 году в Казахстане [Текст] / Л. Ю. Лухнова., У. А. Избанова Т. В. Мека-Меченко, Л. Е. Некрасова, Б. Б. Атшабар, В. С. Казаков, В. Ю. Сущих, Г. М. Оспанова // Журнал «Медицина». – Алматы. – 2017. – №5/179. – С. 56-62.
Tiziana, L. Serologic Surveillance of Anthrax in the Serengeti Ecosystem, Tanzania [Text] / D Romero-Alvarez, AT Peterson, JS Salzer, C Pittiglio, S Shadomy, et al. // Research. – 2011. – V.17. – P. 124-128.
Набиева, Ф.С. Значение иммуноферментного анализа в диагностике инфекционных заболеваний [Текст] / Ф.С. Набиева, Г.А.Душанова, О.О. Бобокулов // Вестник науки и образования. -2021. -№4-1 (107). – С. 45-51.
Кравец, Е.В. Иммуно- и физико-химическая характеристика экстракта поверхностных антигенов Bacillus Anthracis СТИ-1 [Текст] / Е.В. Кравец, С.В. Лукьянова, О.В. Юрьева, В.И. Дубровина, О.Б. Колесникова, К.Ю. Козулина, А.В. Корнева, Н.М. Андреевская // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. -2011. -№3 (79), часть 1. – С. 134–142.
REFERENCES
Michael, F. C. ELISA techniques [Text] / F. Michael, Clark, M. Richard. Lister, Bar-Joseph Moshe // Methods in Enzymology - 1986. - V. 118. – P. 742-766.
Kadastr pochvennyh ochagov sibirskoj yazvy na territorii Respubliki Kazahstan[Tekst]. - Almaty, 2017 g. – S. 263.
ZHakypbek, A. Epizooticheskaya situaciya sibirskoj yazvy po respublike Kazahstan za period s 2014 po 2023 gody [Tekst] / A. ZHakypbek, M. Sejsenbaeva, N. Orazymbetova, ZH. Koshemetov,
B. Umuraliev, I. Akezhan // Vestnik Oshskogo gosudarstvennogo universiteta. Sel'skoe hozyajstvo: agronomiya, veterinariya i zootekhniya, (2(7), -S. 123–135.
https://doi.org/10.52754/16948696_2024_2(7)_13
World Health Organization. Anthrax in humans and animals. 4th ed. Geneva, WHO Press [Text], 2008.
Luhnova, L.YU. Sibirskaya yazva na territorii respubliki Kazahstan v 1999-2020 godah epidemiologicheskaya situaciya [Tekst] / L.YU.Luhnova, U.A.Izbanova, T.V.Meka-Mechenko. // Nacional'nye prioritety Rossii. 2021. -№3. (42).
Romero-Alvarez, D. Potential distributions of Bacillus anthracis and Bacillus cereus biovar anthracis causing anthrax in Africa [Text] / D. Romero-Alvarez, A.T. Peterson, J.S. Salzer, C. Pittiglio, S. Shadomy. // PLOS Neglected Tropical Diseases (2020). - 14(3): e0008131. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0008131
Goel, A.K. Sibirskaya yazva: bolezn' biologicheskoj vojny i znachenie obshchestvennogo zdravoohraneniya [Tekst] / AK. Goel // World J Clin Cases, – 2015. – 3(1): P. 20-33.
Rodionov, A. P. Osobennosti prirodnoj ochagovosti sibirskoj yazvy i ekologii Bacillus anthracis [Tekst] / A.P. Rodionov i dr. // Veterinariya segodnya. – 2021. – №. 2. – S. 151-158.
Hugh, J.M. The ecology of Bacillus anthracis [Text] / M. Hugh Jones, J. Blackburn // Mol.Aspects Med. – 2009. - 30 (6). – Р. 356–367.
Kolonin, G. V. On the role of birds in epizootology of anthrax [Text] / G. V. Kolonin. // Тhe Russian Journal of Ornithology. 2017. – V. 26 (1397). -P. 327–329.
Finke, E. The risk of contracting anthrax from spore-contaminated soil [Text] / E. Finke,
W. Beyer, U. Loderstädt, & H. Frickmann. // A military medical perspective. European Journal of Microbiology and Immunology. - 2020. – 10(2). -Р. 29-63.
Galiullin, A. K. Sub"edinichnyj sibireyazvennyj antigen i ego diagnosticheskoe znachenie [Tekst] / A. K. Galiullin i dr. // Veterinariya. – 1996. – №. 1. – S. 23-25.
Zadorina, I.I. Poluchenie i ochistka protivosibireyazvennyh immunoglobulinov [Tekst] /
I.I. Zadorina // Uchenye zapiski KGAVM im. N.E. Baumana. – 2019. – №4. – S. 142-148.
Abdrahmanov, S.K. Epizooticheskaya ocenka i rajonirovanie territorii Akmolinskoj oblasti po stepeni biologicheskoj bezopasnosti pri sibirskoj yazve [Tekst] / S.K. Abdrahmanov,
E.E. Muhanbetkalie, K.K. Bejsembaev, T.G Bakishev // ISBN 1607 ISBN 1607 – 2774. Semej қalasynyң SHəkərіm atyndaғy MU Habarshysy. – 2016. – №4. (76) - S.3‐7.
Izbanova, U.A. Sovremennaya epizootologo-epidemiologicheskaya situaciya po osobo opasnym infekciyam (sibirskaya yazva, tulyaremiya, brucellez) [Tekst] / U. A. Izbanova,
L. YU. Luhnova, T. N. Kunica i dr. // ZHurnal «Okruzhayushchaya sreda i zdorov'e cheloveka». – Almaty. -2017. – № 1. – S. 23-37.
Luhnova, L. YU. Profilaktika sibirskoj yazvy v Kazahstane [Tekst] / L.YU. Luhnova – Almaty.- 2001. - S. 146.
Luhnova, L. YU. Sibirskaya yazva v 2016 godu v Kazahstane [Tekst] / L. YU. Luhnova.,
U. A. Izbanova T. V. Meka-Mechenko, L. E. Nekrasova, B. B. Atshabar, V. S. Kazakov,
V. YU. Sushchih, G. M. Ospanova // ZHurnal «Medicina». – Almaty. – 2017. – №5/179. – S. 56-62.
Tiziana, L. Serologic Surveillance of Anthrax in the Serengeti Ecosystem, Tanzania [Text] / D Romero-Alvarez, AT Peterson, JS Salzer, C Pittiglio, S Shadomy, et al. // Research. – 2011. – V.17. – P. 124-128.
Nabieva, F.S. Znachenie immunofermentnogo analiza v diagnostike infekcionnyh zabolevanij [Tekst] / F.S. Nabieva, G.A.Dushanova, O.O. Bobokulov // Vestnik nauki i obrazovaniya. -2021. -
№4-1 (107). – S. 45-51.
Kravec, E.V. Immuno- i fiziko-himicheskaya harakteristika ekstrakta poverhnostnyh antigenov Bacillus Anthracis STI-1 [Tekst] / E.V. Kravec, S.V. Luk'yanova, O.V. YUr'eva,
V.I. Dubrovina, O.B. Kolesnikova, K.YU. Kozulina, A.V. Korneva, N.M. Andreevskaya // Byulleten' VSNC SO RAMN. -2011. -№3 (79), chast' 1. – S. 134–142.
